無菌室建設要求使用與管理

無菌室的要求

1．工作室應矮小、平整，面積只需4米2左右，高2.2―2.3米，內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水之材質，便於擦洗及殺菌

2．室內採光面積大，從室外應能看到室內情況。

3．為保證無菌室的潔淨，無菌室周圍需設緩衝走廊，走廊旁再設緩衝間，其面積可小於無菌室。

4．無菌室、緩衝走廊及緩衝間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ，其電源開關均應設在室外。

5．無菌室與緩衝間進出口應設拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。

1、 無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關的物品。

2、 室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動。

3、 每2―3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然後用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最後紫外燈殺菌半小時

4、 定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9釐米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然後倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時；測黴菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌`黴菌總數均不得超過10個為 。

5、無菌室殺菌前，應將所有物品置於操作之部位（待檢物例外），然後打開紫外燈殺菌30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用

6、進入無菌室前，必須於緩衝間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。

7、 操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。

微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理，不同的物件採用不同的處理方法

1、高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內，一般採用121℃滅菌半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理

2、 火焰滅菌： 接種針、接種環等可直接火焰滅菌

3、高溫乾燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置於燥箱中160℃滅菌2小時

4、 一 般消毒: 無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌，必須用其他方法進行消毒處理，採用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進行消毒

準備工作

1、 先進行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30―60分鐘

2、 檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒

3、 操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室

4、進入無菌室後再一次消毒手部，然後才進行檢驗操作

1、 動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染；玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境。

2、 操作應在近火焰區進行。

3、接種環、接種針等金屬器材使用前後均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘乾後再灼燒滅菌。

4、使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。

5、 觀察平板時不好 開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當開縫。